原代培養的實驗所需材料和儀器
材料:胎鼠或新生鼠原代培養儀器:培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、三角燒瓶、平皿、吸管、試管、移液管、無菌紗布、無菌眼科剪刀、廢液缸、血球計數板、蠟盤、手術器械、大頭針、離心管、75%酒精棉球。藥品:培養基(RPMI1640或DMEM)、小牛血清、0.125%胰蛋白酶、Hanks液、75%酒精、雙抗(青霉素和鏈霉素)、2%碘酒。儀器:CO2培養箱、倒置顯微鏡、超凈臺、磁力攪拌器、離心機。附:Hank’s液配方:KH2PO4 0.06g,Nacl 8.0g,NaHCO3 0.35g,KCl 0.4g,葡萄糖1.0g,Na2HPO4·H2O 0.06g,加H2O至 1000ml注:Hank’s液可以高壓滅菌。4℃下保存。......閱讀全文
原代培養的實驗所需材料和儀器
材料:胎鼠或新生鼠原代培養儀器:培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、三角燒瓶、平皿、吸管、試管、移液管、無菌紗布、無菌眼科剪刀、廢液缸、血球計數板、蠟盤、手術器械、大頭針、離心管、75%酒精棉球。藥品:培養基(RPMI1640或DMEM)、小牛血清、0.125%胰蛋白酶、Hanks液、75%酒精、雙抗(青
原代培養實驗的材料和用品的介紹
材料:胎鼠或新生鼠 儀器:培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、三角燒瓶、平皿、吸管、試管、移液管、無菌紗布、無菌眼科剪刀、廢液缸、血球計數板、蠟盤、手術器械、大頭針、離心管、75%酒精棉球。 藥品:培養基(RPMI1640或DMEM)、小牛血清、0.125%胰蛋白酶、Hanks液、75%酒精、雙抗
細胞傷口愈合實驗所需材料和儀器
1.人MDA-MB-231cell(ATCC#HTB-26)2.DMEM培養基(Invitrogen#10313-021)3.胎牛血清(ATCC#30-2020)4.PBS(Invitrogen#14190-144)5.BD24孔細胞培養板(Fisher#08-772-1H;BD#353226)6.
骨髓基質細胞的原代培養材料和方法
材料方法1.材料:1.1材料來源:取自健康成人行骨髓內固定術擴髓前收集骨髓腔內骨髓。1.2主要試劑DMEM培養基胎牛血清(FBS)β-甘油磷酸鈉(β-GP)維生素C青鏈霉素胰蛋白酶(1:250)-EDTA1.3主要儀器設備雙人超凈臺 Farma Scientific美國單人超凈臺 Farma Sci
體細胞雜交所需實驗材料儀器介紹
1.實驗材料:煙草或其它植物無菌苗的葉片。胡蘿卜肉質根誘導的松軟愈傷組織或懸浮培養細胞。2.試劑2.1酶液及洗滌液,同植物原生質體的分離和培養實驗。2.2PEG溶液2.3高pH高鈣稀釋液2.4DPD培養基同植物原生質體的分離和培養實驗。
鞣酸化紅細胞試驗所需儀器和材料
1.紅血球2.反應板分聚苯乙烯塑料板和有機玻璃板(聚甲基丙烯酸甲酯),每板又有96孔和72孔兩種規格。按孔型又可分為V和U型兩種,V型具有更典型的凝集模型,U型有時比V型的血清效價高1~2孔。反應板不能煮沸消毒和浸泡于來蘇兒水中。消毒可用0.5%甲醛溶液,1%新潔爾滅及紫外線照射等。3.稀釋棒由合金
火箭免疫電泳所需使用儀器和材料
(一)材料和試劑1、PH8.6,0.1M巴比妥--巴比妥鈉緩沖液巴比妥鈉 10.3 g巴比妥 1.84 g硫柳汞 100 mg(防腐劑)蒸餾水加熱溶解并定容至500ml2、1%預復瓊脂(或瓊脂糖)1g瓊脂(或瓊脂糖)加蒸餾水100ml溶化即可。3、1.5%瓊脂糖凝膠1.5g瓊脂糖加50ml蒸餾水置水
細胞轉染實驗所需材料和器材
(1)材料293T細胞、MyoD表達質粒和EGFP表達質粒、DMEM培養基、鏈霉素/青霉素(雙抗)、FCS(小牛血清)、PBS(磷酸鹽緩沖溶液)、胰酶/EDTA消化液、轉染試劑(TransFast)(2)器材20ul/200ul/1ml微量移液器和Tip頭酒精燈、廢液缸、血球計數板、渦旋振蕩器、恒溫
細胞劃痕實驗的方法和所需試劑材料
材料:6孔板marker筆直尺20微升槍頭(滅菌)無血清培養基PBS準備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內)流程:1、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻地劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。2、在空中加入約
MDCK細胞培養所需材料和操作步驟
MDCK細胞培養是分離流感病毒及相關研究實驗的基本技術。疾控中心的所有技術人員,必須按照本文件相關的操作規程進行操作。二、適用范圍適用于疾控中心所有技術人員 。三、程序(一)生物安全要求實驗室生物安全級別:BSL-1所有操作必須在BSL-1實驗室的生物安全柜里進行。(二)材料1. 生長成片的MDCK
過濾所需實驗儀器和操作步驟
實驗儀器漏斗、燒杯、玻璃棒、鐵架臺(含鐵圈)、濾紙。操作要領過濾布袋要做到“一貼、二低、三靠”。(見圖)一貼即使濾紙潤濕,緊貼漏斗內壁,不殘留氣泡。(防止氣泡減慢過濾速度。)二低1.濾紙邊緣略低于漏斗邊緣。2.液面低于濾紙邊緣。(防止液體過濾不凈。)三靠1.傾倒時燒杯杯口要緊靠玻璃棒上。過濾海綿2.
胚胎干細胞中飼養層細胞的原代培養實驗材料和步驟
實驗材料12.5d孕鼠、PBS、DMEM、血清、酒精、雙抗、解剖器、培養箱、超凈臺實驗步驟1.性成熟小鼠合籠(♀∶♂=2∶1)2.每天觀察小鼠,見陰道栓后確定為懷孕0.5d。3.取12.5d孕鼠,斷頸處死,在酒精中泡數秒消毒。控干酒精后置于一個無菌的培養皿中。4.無菌條件下暴露子宮。每打開一層要換一
細胞原代培養實驗
胰酶消化法 組織塊直接培養法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成
細胞原代培養實驗
胰酶消化法 組織塊直接培養法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成
細胞原代培養實驗
細胞原代培養可以:(1)為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段;(2)為傳代培養創造條件;(3)服務于臨床實踐,用于藥物篩選等。實驗方法胰酶消化法組織塊直接培養法實驗方法原理將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合
細胞的原代培養實驗
實驗方法原理 細胞培養(Cell culture)是模擬機體內生理條件,將細胞從機體中取出,在人工條件下使其生存、生長、繁殖和傳代,進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。近年來,廣泛地應用于分子生物學、遺傳學、免疫學、腫瘤學、細胞工程等領域,發展成一種重要生物技術,并取得顯著成就
原代培養的實驗步驟
以胚胎小鼠為例1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數秒消毒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的消毒器械。最后取出雙角子宮置于無菌平皿內。2.用Hanks液洗滌3次,剪開子宮取出胚胎。除去子宮、血液和筋膜等組織
細胞的原代培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養,由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養創造條件。最常用的原代培養有組織塊培養和分散
細胞的原代培養實驗
原代培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養,由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生
細胞的原代培養實驗
實驗方法原理原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養,由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養創造條件。最常用的原代培養有組織塊培養和分散細胞培養。組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上,加入
原代培養的實驗原理
將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養。細胞培養是生物學和醫學研究最常用的手段之一,可分為原代培養和傳代培養兩種。原代培養是直接從生物體獲取細胞進行培養。由于
原代細胞的培養和維持
一、原代細胞的培養與維持1、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)凡經消化液處理實體組織來源的細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L,培養基可用 Eagle(MEM)或DNEM培養,小牛血清濃度為10%~80%。在起始的2天中盡量減少振蕩,以
原代培養的實驗操作要領
混勻操作要領(1)火焰消毒吸管,用Hanks液冷卻和濕潤管內壁(這是因為剛分離的組織細胞易粘在管壁上)(2)吸管頭插入管底(3)用吸管反復輕輕吹打組織塊器械的使用(1)用工作臺消毒鑷子取浸泡在酒精中消毒的器械。(2)器械置無菌干紗布內嚓一下。迅速通過火焰,冷卻后使用。(3)用過的器械置另一加蓋的器皿
原代培養的實驗步驟介紹
1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數秒消毒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的消毒器械。最后取出雙角子宮置于無菌平皿內。 2.用Hanks液洗滌3次,剪開子宮取出胚胎。除去子宮、血液和筋膜等組織。
原代培養技術的實驗步驟
以胚胎小鼠為例1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數秒消毒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的消毒器械。最后取出雙角子宮置于無菌平皿內。2.用Hanks液洗滌3次,剪開子宮取出胚胎。除去子宮、血液和筋膜等組織
腫瘤細胞原代培養實驗
組織塊法 酶消化法 脫落細胞法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血
腫瘤細胞原代培養實驗
實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血清濃度即可,在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)以利細胞生長。用細胞生長因子如胰島素、氫化可的松、雌激素等等。也可以考慮動物媒介培養。根據細胞種類不同選用
腫瘤細胞原代培養實驗
組織塊法 酶消化法 脫落細胞法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血
細胞培養傳代培養所需材料
1、無菌磷酸生理緩沖液(Dulbecco’sphosphate-bufferedsaline,Ca++/Mg++free,D-PBS, GibcoBRL21600-010)2、trypsin-EDTAsolution(0.05%trypsin-0.53mMEDTA-4Na,GibcoBRL25300
常用原代動物細胞培養:肝星狀細胞培養材料和方法
材料 相差顯微鏡,熒光顯微鏡,手術器械,雄性SD大鼠,體重250-450 g,戊巴比妥鈉,200目尼龍網,小牛血清(或胎牛血清,則更好),DMEM,胰酶消化液(以HBSS配),Nycodenz(以GBSS配),D- Hanks'(KCl 0.4 g/L,KH2PO4 0.06 g